obiecte
abstract
În absența biomarkerilor de laborator care se corelează cu succesul clinic al imunoterapiei cu alergeni, parametrii clinici, adică scorurile obiective ale medicației, scorurile vizuale analogice subiective și problemele percutanate, conjunctivale și ale alergenilor respiratori, sunt metode actuale pentru determinarea efectelor. imunoterapie cu alergeni. Dintre aceste provocări alergenice din camerele de inducție a alergenilor, standardul aur este de 16, 17, 18. Recent, a fost utilizată o cameră de provocare cu alergen de mediu pentru a demonstra eficacitatea clinică a unei tablete sublinguale HDM. După 6 ore de expunere, scorul total al simptomelor nazale a fost obiectivul primar, scorul total al simptomelor oculare și simptomele totale au înregistrat obiective secundare în acest studiu. Probele din acest studiu clinic au fost examinate în acest studiu.
Prin urmare, am emis ipoteza că imunoterapia cu alergeni reușită poate neutraliza efectele stimulării alergenice asupra eritrocitelor și neutrofilelor și se poate corela cu îmbunătățirea clinică. Scopul acestui studiu a fost, prin urmare, i) să confirme modificările observate anterior ale numărului de celule sanguine cu un alt alergen, HDM, în camera de expunere a mediului și ii) să compare parametrii de laborator pentru eritrocite și granulocite înainte și după expunerea la HDM la subiecții AR tratați cu SLIT versus placebo 15 .
Rezultatul
Caracteristicile subiectului
Tabel în dimensiune completă
Inducerea alergenilor și a eritrocitelor
Numărul absolut de eritrocite, valorile hematocritului (p
Interesant, am observat, de asemenea, modificări ale MCH și MCHC cu semnificație statistică inconsistentă în analiza subgrupului. Întrucât MCH și MCHC sunt valori de laborator calculate în funcție de concentrația hemoglobinei și a numărului de eritrocite (MCH) sau hematocrit (MCHC), am atribuit aceste constatări unei scăderi semnificative a numărului de eritrocite și a hematocritului în comparație cu niveluri mai stabile de hemoglobină.
În studiul nostru, nu au existat diferențe semnificative între subiecții de sex feminin și bărbați, altele decât diferența fiziologică cunoscută dependentă de sex în numărul de eritrocite, nivelurile de hemoglobină și hematocrit. Deși s-au găsit tendințe similare în toate subgrupurile de tratament, semnificația statistică nu a fost întotdeauna atinsă după o subdiviziune ulterioară în subiecți bărbați și femei.
În cele din urmă, doar numărul de eozinofile s-a corelat cu starea de tratament a indivizilor. După expunerea la alergeni, numărul de eozinofile circulante în ambele grupuri HDM SLIT a rămas neschimbat, dar a scăzut ușor în grupul placebo. Recrutarea eozinofilelor din fluxul sanguin și arestarea acestora pe endoteliu activ și extravazare a fost descrisă în bolile alergice ale căilor respiratorii 23, 35. Există diverse explicații pentru mecanismele imunoterapiei cu alergeni. T regs 36 și B regs 37 ca surse ale citokinelor imunomodulatoare IL-10 și TGFβ acționează împotriva dominanței citokinelor Th2 în alergie, inclusiv a citokinei Th2 IL-5. IL-5 este un activator important pentru eozinofile și acționează în mucoasa nazală, în special în reacția alergică târzie 38. Așa cum s-a arătat recent în modelul 39 al mouse-ului, SLIT ar putea contribui la o prejudecată Th2 generală mai mică.
concluzie
Din câte știm, acesta este primul studiu care analizează numărul de celule sanguine periferice după stimularea alergenului la pacienții cu RA după imunoterapie specifică. În general, studiul nostru a arătat că (i) numărul de eritrocite circulante scade semnificativ după expunerea specifică la alergeni la subiecții cu rinită alergică, probabil din cauza eritozei induse de leucotriene; (ii) numărul leucocitelor, în special neutrofilele segmentate, crește după stimularea alergenului, independent de imunoterapia anterioară; (iii) subiecții tratați cu placebo - probabil compensatori - au niveluri eritrocitare inițiale mai mari decât pacienții după un tratament SLIT eficient, (iv) doar dinamica eozinofilică a diferit între subiecții care primeau imunoterapie și subiecții cărora li s-a administrat placebo. Aceste observații sunt în concordanță cu constatările noastre anterioare privind dinamica RBC după stimularea alergenilor și implică implicarea eritrocitelor și neutrofilelor în reacția alergică acută.
metode
obiecte
În acest studiu cu boli monocentrice, la subiecți sănătoși (n = 77) cu antecedente de alergie la HDM, acestea au fost efectuate la Camera de provocări din Viena (VCC) 15 .
Sensibilizarea alergenilor la HDM (Der p, Der f sau ambele) a fost evaluată prin evaluarea IgE specifică și testarea în prealabil a înțepăturii pielii. Toți subiecții au participat anterior la un studiu randomizat, dublu-orb, farmacologic al eficacității dozei dependente de comprimatele de imunoterapie sublinguală HDM 15 și au primit fie imunoterapie sublinguală HDM cu doză mică (6 DU), fie doză mare (12 DU) imunoterapie sublinguală. -8237 [Merck/ALK-Abelló]) pentru un total de 24 de săptămâni. Datele prezentate în acest studiu au fost evaluate la voluntari la 3 până la 16 luni (⦰ 8, 4 luni) după încheierea studiului MK-8237 (24 de săptămâni SLIT și alte 2 săptămâni de urmărire). (Tabelul 1) Cererile de alergeni pentru HDM au fost aprobate de comitetul de etică „Österreichische Arbeitsgemeinschaft für Klinische Pharmakologie” (1811/2013), iar colectarea datelor a avut loc între 11/2013 și 10/2014 cu subiecți voluntari după obținerea consimțământului informat scris al fiecăruia participant., Toate studiile privind VCC sunt strict efectuate în conformitate cu GCP (Good Clinical Practice).
Criterii de includere
varsta 18 - 65 ani
subiecți sănătoși, cu excepția rinitei alergice și astmului intermitent sau ușor, care nu necesită tratament și este asociat cu funcția pulmonară normală inițială (FEV1 ≥ 70% prezis)
testul pozitiv al înțepăturii pielii (stratul ≥ 3 mm comparativ cu martorul standard [salină]) și IgE specifică (≥ 0,7 kU/l, clasa de test radioalergosorbent [RAST] ≥ 2) rezultate pentru Der pa/sau Der f în ultimii 12 înainte de începutul studiului
Criteriu de excludere
anomalii nazale (perforație septală, polipi, malformații)
simptome de frig sau infecții acute ale tractului respirator superior în decurs de 3 săptămâni
boli respiratorii active, altele decât astmul ușor, care nu necesită tratament
imunoterapie în curs de desfășurare și/sau medicamente imunomodulatoare
intervenții
Alergen Airway provocare
Un amestec de părți egale ale întregului corp Der p și Der f (Allergon, Thermo Fisher Scientific, Ångelholm, Suedia) și o parte mai mică a extractului de fecale dermatofagide (Citeq Biologics, Groningen, Olanda) (10: 10: 1 raport) a fost utilizat pentru a provoca alergeni în camera de provocare. Produsele alergenice utilizate pentru amestec au fost furnizate de producătorii respectivi, inclusiv certificate de analiză, și depozitate la +2 până la +10 ° C (corpuri întregi) sau congelate la -25 ° C (fecale) în ambalajul original. Provocarea alergenului căilor respiratorii a fost efectuată într-un VCC (54 m 3 cameră de provocare sigilată) timp de 6 ore consecutive, după cum s-a descris mai sus. (21) Concentrația amestecului de alergeni HDM în aer a fost monitorizată și menținută constantă. Simptomele alergice au fost evaluate la fiecare 15 minute, adică scorul total al simptomelor nazale (TNSS - strănut, blocaj, rinită și mâncărime în nas). Mai mult, la fiecare 30 de minute volumul aerului purtător (rinomanometrie activă anterioară) și la fiecare 60 de minute valorile volumului fluxului de aer bronșic (spirometrie) au fost evaluate din motive de siguranță.
Colectarea celulelor sanguine
Sângele a fost colectat imediat înainte și după 6 ore de expunere la alergen din venele periferice și prelevat în tuburi acoperite cu acid etilendiaminetetraacetic (EDTA). Probele de sânge EDTA au fost stocate scurt la +2 ° C până la +10 ° C și trimise la un laborator certificat ISO 9001 (Labors.at, Viena, Austria) pentru analiza diferențială a celulelor sanguine și determinarea hemoglobinei [Hb] și a hematocritului [Hc ].
analize statistice
Datele au fost analizate de ANOVA (parametrizare limitată a limitării sigmei) cu trei factori: grup (placebo, doză mică și mare) și sex între subiecți și înainte/după doza de provocare ca factor în cadrul subiectului. Comparația cu placebo a fost efectuată folosind contraste liniare. Normalitatea reziduurilor a fost testată prin testele Kolmogorov-Smirnov cu corecția Lilliefors. Omogenitatea variațiilor a fost testată prin testele lui Levene. Transformarea arcsinei a fost utilizată pentru numărul relativ de celule albe din sânge. Pentru toate testele statistice, p